（四）马立克氏病疫苗
马立克氏病（marek’sdisease，md）又名神经淋巴瘤病（neu⁃rolymphomatosis），是由马立克氏病毒引起的以危害淋巴系统和神经系统，引起外周神经、性腺、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤的单个或多个组织器官发生肿瘤为特征的禽类传染病，我国将其列为二类动物疫病。
目前，本病在世界各地均有分布，养禽业越发达的国家，本病发生越严重。马立克氏病疫苗在控制本病中起着关键作用，应按免疫程序预防接种马立克氏病疫苗，防止疫病发生。
1.马立克氏病疫苗的种类及应用
马立克氏病毒分为3个血清型，血清1型对鸡具有致病性和致瘤性；血清2型对鸡无致病性和致瘤性，又称自然无毒力株；血清3型，是火鸡的疱疹病毒（hvt）。3种血清型毒株既有特异性型抗原，又具有共同抗原，只能用单克隆抗体才能将这3种血清型毒株区分开来。马立克氏病疫苗免疫是以细胞免疫为主，体液免疫为辅。目前的疫苗都是活疫苗，通常有血清1型疫苗，如减弱毒力株cv1⁃988和814株制备的疫苗；血清2型疫苗，如sb⁃1株和301b/1株；血清3型疫苗以及多价疫苗。
（1）鸡马立克氏病活疫苗（cvi988/rispens株）
【主要成分】含鸡马立克氏病病毒cvi988/rispens株，每羽份至少含3000pfu。
【物理性状】本品为淡红色细胞悬液。
【作用与用途】用于预防鸡马立克氏病。
【用法与用量】按照瓶签注明羽份，用稀释液稀释，每只雏鸡肌内或皮下注射0.2毫升。
【不良反应】一般无可见不良反应。
【注意事项】1操作人员戴上手套和面罩，以防损伤，打开液氮罐，将提筒垂直提至液氮罐颈部，迅速取出安瓿（每次只取出1只），立即将提筒放回罐内，提筒钩要复位，盖好罐塞。安瓿在液氮罐外空气中暴露的时间越短越好，最好不要超过10秒钟。2取出的安瓿应立即放入27c～35c温水中速融（不能超过60秒），疫苗一旦解冻就不能再放回液氮中。3取出疫苗安瓿，立即用挤干的酒精棉球消毒瓶颈，注意瓶上不能留有酒*体。轻弹安瓿顶部（防止疫苗滞留在安瓿顶部），小心开瓶。用连接17号或13号针头的无菌注射器从安瓿中吸出疫苗，立即缓缓注入25c左右的专用疫苗稀释液中，并用稀释液多次洗涤安瓿，避免疫苗损失，按瓶签注明的羽份，每只鸡皮下或腹腔内注射0.2毫升（1羽份）。稀释时间不超过30秒。4疫苗与稀释液混合后，随时旋转混匀，以免因细胞沉淀造成接种量不均匀。5疫苗必须现配现用，稀释后的疫苗应保持在25c（±2c）条件下，1小时内用完。6鸡马立克氏病活疫苗（cvi988/rispens株）是一种细胞结合性疫苗，必须在液氮中保存和运输。7疫苗应现配现用，稀释前必须先检查鸡马立克氏病活疫苗专用稀释液，如发现玻瓶破裂、瓶签不清、变色、有异物（长霉）及已过有效期等，均不能使用。8稀释液严禁冻结和暴晒，与疫苗混合前，稀释液应达到25c（±2c）。9在接种疫苗过程中，应避免注射器的连接管内有气泡或出现断液现象，以保证每只雏鸡的接种量准确。在接种本疫苗后的48小时内不得在同一部位注射抗生素或其他药物。10注射用具使用前应进行灭菌处理，以防微生物，特别是绿脓杆菌污染。○1剩余的疫苗及空瓶不能随意丢弃，须经加热或消毒灭菌后方可废弃。
【贮藏与有效期】在液氮中保存，有效期为24个月。
（2）鸡马立克氏病活疫苗（814株）
【主要成分】系用鸡马立克氏病814弱毒株接种鸡胚成纤维细胞，经过培养加入适量保护剂后，经真空冻干制成。本品含鸡马立克氏病病毒814株，每羽份所含的蚀斑数应不低于2000pfu。
【物理性状】冰冻状态，融化后为淡红色悬浊液，加入稀释剂后即溶解成均匀的混悬液。
【作用与用途】预防鸡马立克氏病。接种后8天产生免疫力，免疫保护期为18个月。
【用法与用量】按标签注明羽份用专用稀释液稀释。本品专供1日龄雏鸡使用，每羽颈部皮下或肌内注射0.2毫升。
【不良反应】对健康鸡群一般无不良反应。
【注意事项】1疫苗须在液氮中保存与运输，从液氮罐中取出疫苗安瓿时应注意人身保护，应戴手套及眼镜，右手用长镊子夹出安瓿迅速放入38c温水的罐内，同时左手用盖盖上罐口，防止万一安瓿炸裂玻片飞出，同时把夹住的安瓿在温水中轻轻摇动约1分钟，以达到速溶的目的。2稀释好的疫苗应注意避免日光照射，开启后1小时内用完。在免疫注射期间应常摇动疫苗瓶，使之均匀。3雏鸡舍在入雏前应彻底消毒。4液氮罐在保存期间应定期补足液氮，如发现液氮耗尽时，应将该罐保存的疫苗废弃。5剩余的疫苗及空瓶不能随意丢弃，须经加热或消毒灭菌后方可废弃。
【贮藏与有效期】液氮中保存，有效期为24个月。
（3）鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗
【主要成分】本品含火鸡疱疹病毒fc⁃126株，每羽份所含蚀斑数不低于2000pfu。
【物理性状】本品为乳白色疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。
【作用与用途】用于预防鸡马立克氏病，适用于各品种的1日龄雏鸡。
【用法与用量】肌内或颈部皮下注射，按瓶签注明羽份，加专用配套稀释液稀释，每只注射0.2毫升。取下疫苗瓶和稀释液瓶上的小铝盖，用酒精棉球擦拭瓶塞表面，待瓶塞表面酒精晾干后，将注射器针头插入稀释液瓶中，抽取3毫升稀释液注入疫苗瓶内。振摇疫苗瓶，直至疫苗成为混悬液，然后将混悬液抽至针筒内。将针筒内的混悬液注入稀释液瓶中，混合均匀后即可使用。
【不良反应】一般无可见不良反应。
【注意事项】1本品在运输和使用时，若气温在10c以上，必须放在装有冰块的冷藏容器内，气温在10c以下可用普通包装运送；严禁阳光照射和接触高温，各单位收到疫苗后应立即冷冻保存。2本品在使用前应仔细检查，如发现玻瓶破裂，没有瓶签或瓶签不清楚，疫苗中混有杂质，已过有效期或未在规定条件下保存者，均不能使用。3本品应随用随稀释，配制本品的专用稀释液用前应置于2c～8c冰箱或盛有冰块的容器中预冷，稀释后的疫苗应放于冷暗处，并限在1小时内用完。4本品配好后应轻轻摇动，充分混匀，但不要使溶液起泡，使用中每10分钟左右应将疫苗摇动1次，以使每只雏鸡得到准确的病毒粒子。5在已发生过马立克氏病的鸡场，雏鸡应在出壳后立即进行预防注射，注射前场地、鸡舍、工具应先清洁干净并彻底消毒，注射后的雏鸡应隔离饲养观察3周，并加强管理工作，防止通过饲料、空气、饮水等感染强毒。6接种用具用前须经高温灭菌，接种后剩余疫苗、空瓶、稀释液和接种用具等应进行消毒处理。7疫苗应在兽医的指导下正确使用。
【贮藏与有效期】在-15c以下保存，有效期为18个月。
（4）鸡马立克氏病二价苗（hvt+301b/1）
【主要成分】本品含火鸡疱疹病毒fc⁃126株与301b/1株。
【物理性状】本品为乳白色疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。
【作用与用途】用于预防各品种1日龄雏鸡的马立克氏病。
【用法用量】注射时，每瓶疫苗可溶解稀释于200毫升的专用稀释液中，健康鸡每只注射0.2毫升。
【注意事项】1本疫苗需使用专用稀释液稀释溶解混合后使用。2专用稀释液需在室温保存，不得冷藏，存放于荫凉处。3稀释液内勿添加任何抗生素或其他药物。4解冻后抽取疫苗时使用18号针头。注入稀释液后需再回抽冲洗疫苗玻璃瓶壁。5接种注射器可使用20～22号针头，每注射1000～2000只小鸡应更换1根针头。6器材使用后要煮沸消毒，勿用化学药品消毒。71次溶解1支疫苗，稀释后需在1小时内使用完毕。8随时检查液氮罐中液氮的高度，任何时候液氮罐中液氮的高度不得低于10厘米，贮存、运送及操作时都必须小心谨慎。9雏鸡运抵商用鸡场后，1～14日龄务必严格隔离，育雏舍应与中、大鸡舍分开或远离。10剩余的疫苗及空瓶不能随意丢弃，须经加热或消毒灭菌后方可废弃。
【贮藏与有效期】液氮中保存，有效期为24个月。
（5）鸡马立克氏病1型+3型二价活疫苗（cvi988+fc126株）
【主要成分】采用低代次的马立克氏病1型cvi988种毒和3型fc126种毒分别生产，混合制成二价活疫苗。
【物理性状】本品为乳白色疏松团块，易与瓶壁脱离，加稀释液后迅速溶解。
【作用与用途】用于预防各品种1日龄雏鸡的马立克氏病。
【用法与用量】按瓶签注明羽份用专用稀释液稀释，每只雏鸡肌内或皮下注射0.2毫升。
【不良反应】一般无可见不良反应。
【注意事项】1工作人员需戴上手套和面罩，以防损伤。打开液氮罐，将提筒垂直提至液氮罐颈部，暴露出要取的安瓿并迅速取出（每次只取出1只），然后立即将提筒放回罐内，提筒钩要复位，盖好罐塞。取出的安瓿应立即放入27c～35c温水中速融（不能超过60秒），疫苗一旦解冻就不能再放回液氮中。2疫苗稀释时，取出疫苗安瓿，立即用挤干的酒精棉球消毒瓶颈，注意瓶上不能留有酒*体，并轻弹安瓿顶部，防止疫苗滞留在安瓿顶部，小心开瓶。用稀释液多次洗涤安瓿，避免疫苗损失，稀释前必须先检查疫苗专用稀释液，如发现玻瓶破裂、瓶签不清、变色、有异物（长霉）及已过有效期等，均不能使用。疫苗稀释后应在1小时内用完。接种过程中应经常轻摇稀释的疫苗（避免产生泡沫），使细胞悬浮均匀。稀释液严禁冻结和暴晒，与疫苗混合前，稀释液应达到25c（±2c），稀释后应保持在该温度范围内，稀释时间不超过30秒。同时，禁止在稀释液中加入抗生素、维生素、其他疫苗或药物。3在接种疫苗过程中，应避免注射器的连接管内有气泡或断液现象，以保证每只雏鸡的接种量准确。在接种本疫苗后48小时内不得在同一部位注射抗生素或其他药物。注射用具使用前应进行灭菌处理，以防微生物特别是绿脓杆菌污染。4疫苗注射1周后可产生免疫力，在疫苗产生免疫力之前应采取有效措施防止孵化室和育雏舍内发生早期强毒感染。5剩余的疫苗及空瓶不能随意丢弃，须经加热或消毒灭菌后方可废弃。
【贮藏与有效期】液氮中保存，有效期为24个月。
2.导致鸡马立克氏病免疫失败的原因分析
1接种剂量不当。常用的商品疫苗要求每个剂量含1500～2000以上pfu，接种该剂量7天后产生免疫力。若疫苗贮藏过久或稀释不当、接种程序不合理或稀释好的冻干苗未在1小时内用完，均会导致雏鸡接受的疫苗剂量不足而引起免疫失败。2早期感染疫苗免疫后至少要经1周才能使雏鸡产生免疫力，而在接种后3天，雏鸡易感染马立克氏病并引起死亡，而且火鸡疱疹病毒疫苗不能阻止马立克氏病强毒株的感染。由此，改善卫生措施可以避免早期感染，但难以预防多种日龄混群的鸡群感染。3母源抗体的干扰。血清1型、2型、3型疫苗病毒易受同源母源抗体干扰，细胞游离苗比细胞结合苗更易受影响，而对异源疫苗的干扰作用不明显。4超强毒株的存在。传统疫苗不能有效地抵抗马立克氏病超强毒株的攻击，从而引起免疫失败。5品种的遗传易感性。某些品种鸡对马立克氏病具有高度的遗传易感性，难以进行有效免疫，甚至免疫接种后仍然易感。6免疫抑制和应激感染鸡传染性法氏囊病毒、网状内皮组织增生症病毒、鸡传染性贫血病病毒等均可导致鸡对马立克氏病的免疫保护力下降，以及环境应激导致免疫抑制可能是引起马立克氏病疫苗免疫失败的原因。
总之，采用疫苗接种是控制本病的极重要的措施，但疫苗的保护率均不能达到100%，因此鸡群中仍有少量病例发生，故不能完全依赖疫苗接种，加强综合防疫措施是十分必要的。